大规模蛋白表达服务实验服务内容

一、参数信息

1.               表达系统支持工业化级表达平台，包括：

1.               原核系统：大肠杆菌高密度发酵系统（5L-100L 发酵罐），适合可溶性 / 包涵体蛋白大规模生产

2.               真核系统：昆虫细胞杆状病毒表达系统（悬浮培养）、哺乳动物细胞 CHO/HEK293 悬浮培养系统，满足糖基化等翻译后修饰需求

3.               无细胞表达：快速小规模预实验优化，衔接大规模发酵工艺

1.               载体类型提供高拷贝质粒载体（pET/pGEX 系列）、病毒载体（慢病毒 / 腺病毒）及自主研发的稳定表达载体，支持多顺反子构建与筛选标记优化

2.               表达规模单次服务产能覆盖50mg-5g（视蛋白特性及系统差异），提供梯度放大工艺（从摇瓶到中试罐）

3.               表达周期

1.               原核系统：2-3 周（含发酵工艺优化）

2.               真核系统：3-5 周（含细胞株驯化与培养条件优化）

3.               工艺放大阶段：额外 1-2 周

二、使用信息

1.               服务流程

1.               需求确认：明确目标蛋白用途（药用 / 工业 / 科研）、纯度要求（≥90%/≥95%/≥98%）及后续应用场景

2.               工艺开发：小试优化表达条件（培养基配方、诱导参数、纯化方案），提供表达量预评估报告

3.               规模放大：基于小试数据进行发酵罐工艺放大，实时监控 OD 值、溶氧、pH 等关键参数

4.               产物交付：完成亲和层析 / 离子交换 / 凝胶过滤纯化，提供 SDS-PAGE/HPLC 检测报告及冻干 / 液体形式蛋白成品

1.               适用范围面向生物制药（抗体药物中间体）、工业酶制剂（蛋白酶 / 淀粉酶）、疫苗研发（重组蛋白抗原）等领域的中试及量产前工艺验证

2.               客户需提供材料

1.               目的基因序列（含酶切位点信息）及密码子优化建议

2.               目标蛋白特性（分子量、等电点、疏水性）与功能活性要求

3.               特殊工艺需求（如无动物源成分、GMP 级生产预认证）

三、注意事项

1.               实验前

1.               需提前确认基因序列与所选表达系统的兼容性（如哺乳动物细胞需去除原核毒性序列）

2.               高难度蛋白（膜蛋白 / 糖蛋白）建议先进行小试预实验，降低大规模生产风险

1.               实验中

1.               发酵过程中每 4 小时反馈关键工艺数据，若出现表达量骤降 / 杂蛋白超标，需共同决策是否终止或优化参数

2.               纯化方案调整需客户确认（如是否接受亲和标签残留）

1.               实验后

1.               冻干粉需在 - 20℃保存，液体样本建议分装后 - 80℃冻存，避免反复冻融

2.               提供 3 个月内免费售后技术支持（蛋白活性复溶指导、残留杂质检测咨询）

1.               合规承诺

1.               严格遵守 GLP 规范，涉及药用蛋白的生产流程可提供工艺验证报告

2.               签署保密协议，保障客户基因序列及工艺参数不外流