小规模蛋白纯化服务实验服务内容

一、参数信息

1.               纯化技术提供多种主流纯化方法，支持单步或组合工艺：

1.               亲和层析（His 标签 / Strep 标签 / GFP 标签等）：特异性捕获目标蛋白，适合带标签重组蛋白

2.               离子交换层析（阳离子 / 阴离子）：基于电荷差异分离蛋白，去除电荷异质体

3.               凝胶过滤层析：按分子量大小分级纯化，兼具脱盐与 Buffer 置换功能

4.               疏水相互作用层析：分离疏水性差异蛋白，适合包涵体复性后纯化

1.               处理规模单次服务处理样本体积范围：50μL-50mL（对应蛋白量 5μg-5mg），支持裂解上清、细胞培养上清、包涵体溶解液等不同起始样本。

2.               纯度目标

1.               基础纯化：纯度≥90%（适用于抗体筛选、酶活性初步检测）

2.               精细纯化：纯度≥95%（适用于结构分析、功能研究）

3.               超高纯度：纯度≥98%（需定制化多步层析工艺，加收 20% 服务费）

1.               纯化周期

1.               单标签亲和层析：1-2 个工作日

2.               两步组合工艺（如亲和 + 凝胶过滤）：2-3 个工作日

3.               无标签蛋白纯化（需电泳切割 / 免疫沉淀）：3-5 个工作日

二、使用信息

1.               服务流程

1.               样本提交：客户提供蛋白样本（注明表达系统、标签类型、保存状态）及纯化需求（纯度目标、Buffer 偏好、是否保留标签等）

2.               方案设计：根据蛋白特性（分子量、等电点、稳定性）定制纯化策略，提供预实验可行性分析

3.               纯化执行：使用 AKTA 蛋白纯化系统进行层析分离，实时记录层析图谱

4.               检测交付：提供 SDS-PAGE 电泳图、蛋白浓度（Bradford 法 / BCA 法）及纯度分析报告，交付冻干粉末或液体样本（体积≤1mL）

1.               适用场景适用于科研实验室重组蛋白纯化、天然蛋白粗提物精制、抗体片段（如 scFv、Fab）分离、蛋白复合体初步纯化等小规模实验需求。

2.               客户需提供材料

1.               待纯化样本（注明体积、浓度、保存条件及是否为包涵体形式）

2.               目标蛋白基本信息（氨基酸序列、标签类型、预期分子量）

3.               特殊要求（如无动物源试剂、生物安全等级、放射性标记蛋白处理）

三、注意事项

1.               实验前

1.               请确保样本中目标蛋白占比≥5%（过低表达量可能导致纯化失败，建议先进行表达优化）

2.               无标签蛋白需提前说明纯化策略（如利用等电点差异或免疫亲和法，成功率受蛋白特性影响较大）

1.               实验中

1.               若纯化过程中出现蛋白降解（电泳显示多条带），需客户确认是否接受截短体或调整纯化条件（如添加蛋白酶抑制剂）

2.               标签切除服务（如凝血酶 / 肠激酶酶切）需额外提供酶切试剂，周期延长 1 个工作日

1.               实验后

1.               液体样本建议分装后 - 80℃保存，冻干样本需避光防潮，避免反复冻融导致蛋白聚集

2.               提供 15 天内免费复检服务（仅限浓度与纯度检测，不包含重新纯化）

1.               合规说明

1.               涉及生物安全样本（如病毒蛋白、致病微生物来源）需提前申报，签署特殊样本处理协议

2.               实验数据与样本信息严格保密，默认保存 3 个月后销毁（可申请延长保存）