多克隆抗体制备（免疫小鼠/兔）实验服务内容

一、参数信息

1.               免疫动物

1.               小鼠：常用品系 BALB/c（6-8 周龄雌性）、C57BL/6，单次免疫需 3-5 只

2.               家兔：新西兰白兔（2-3kg 雌性），单次免疫需 1-2 只

3.               特殊品系（如基因敲除小鼠）可接受定制

1.               抗原类型

1.               重组蛋白：纯度≥85%（提供 SDS-PAGE 验证），推荐用量 50-100μg / 小鼠、500-1000μg / 兔

2.               合成多肽：需预先偶联载体蛋白（KLH/BSA，默认提供偶联服务），长度 15-20 个氨基酸（含抗原表位）

3.               细胞 / 组织裂解物：需注明生物安全等级，建议蛋白浓度≥1mg/mL

1.               免疫周期

1.               小鼠：4-6 周（基础免疫 3 次 + 加强免疫 1 次，间隔 7-10 天）

2.               家兔：6-8 周（基础免疫 4 次 + 加强免疫 1 次，间隔 10-14 天）

3.               末次免疫后 7-10 天进行心脏 / 耳缘静脉采血

1.               抗体形式

1.               抗血清：直接提供未纯化血清（体积：小鼠≥0.5mL / 只，兔≥10mL / 只）

2.               纯化 IgG：可选 Protein A/G 亲和层析纯化（纯度≥95%，回收率≥80%，加收 30% 服务费）

二、使用信息

1.               服务流程

1.               抗原准备：客户提供抗原或委托合成 / 纯化（需额外 3-5 个工作日），我方进行浓度测定与免疫原性评估

2.               免疫方案：根据抗原特性选择佐剂（弗氏完全 / 不完全佐剂、铝佐剂），制定个性化免疫路线图

3.               采血与检测：末次免疫后检测血清效价（ELISA 法，效价≥1:10,000 默认达标），达标后进行全量采血

4.               交付内容：抗血清 / 纯化 IgG、实验报告（含免疫记录、效价检测图、抗体浓度）

1.               适用场景

1.               科研级抗体制备（适用于 WB、ELISA、IHC 等检测）

2.               初步抗体筛选（为单克隆抗体制备提供免疫血清）

3.               低丰度蛋白检测（利用多克隆抗体的广谱识别特性）

1.               客户需提供材料

1.               抗原样本（注明类型、浓度、保存条件及序列信息，多肽需提供抗原表位位置）

2.               免疫动物选择（小鼠 / 兔及品系偏好）

3.               特殊要求（如无佐剂免疫、抗生素使用限制、生物安全等级 2 级以上样本）

三、注意事项

1.               实验前

1.               多肽抗原需确保表位无同源性（避免与宿主蛋白交叉反应），我方提供免费 BLAST 同源性分析

2.               重组蛋白需确认无内毒素污染（推荐＜10EU/mg，过高可能影响免疫效果）

1.               实验中

1.               若首次 ELISA 效价＜1:5,000，可免费追加 1 次加强免疫（仅限小鼠，兔需协商补免方案）

2.               免疫过程中动物出现过敏反应时，将暂停实验并与客户协商替代方案（如更换佐剂）

1.               实验后

1.               抗血清需 - 20℃分装保存，避免反复冻融（建议每管≤100μL 小鼠血清 / 1mL 兔血清）

2.               提供 2 个月内免费效价复检服务（仅限原血清样本，不包含重新纯化）

1.               合规与保密

1.               实验动物管理符合 AAALAC 认证标准，提供动物使用伦理审查文件（如需）

2.               签署保密协议，客户抗原序列及免疫数据仅用于本次服务，默认 3 年后数据销毁