原核蛋白表达基因设计服务实验服务内容

一、参数信息

1.               设计对象

1.               序列范围：支持全长编码基因（≤5000 bp）、功能结构域片段的原核表达优化设计

2.               蛋白类型：覆盖酶类（如工业用蛋白酶）、受体蛋白、抗原蛋白（如疫苗抗原）、标签融合蛋白（His/GFP 标签等）

1.               优化技术

1.               密码子优化：基于目标宿主（大肠杆菌 BL21/DE3、Rosetta 等）偏好性，替换稀有密码子（优化效率≥95%）

2.               结构优化：调整 GC 含量至 40%-65%，消除发卡结构 / 重复序列，增强 mRNA 稳定性

3.               元件配置：标配 T7 启动子 / 终止子（大肠杆菌适用）、RBS 序列优化（提升核糖体结合效率），可定制信号肽 / 纯化标签编码序列

1.               交付内容

1.               核心文件：优化后基因序列（FASTA 格式）、设计报告（含密码子使用频率对比表、二级结构预测图）

2.               可选服务：基因合成（克隆至 pET/pGEX 等载体，提供质粒测序报告，加收 150% 服务费）

1.               服务周期

1.               基础设计：3 个工作日（适用于≤1000 bp、无特殊修饰的序列）

2.               复杂项目：5-7 个工作日（含多标签融合设计、毒性蛋白表达优化等特殊需求）

二、使用信息

1.               服务流程

1.               需求提交：客户提供目的蛋白氨基酸序列、目标菌株（如 E. coli BL21）、标签类型（如 N 端 His-tag）及表达偏好（可溶性 / 包涵体表达）

2.               技术分析：通过生物信息学工具（如 Codon Usage ）分析宿主密码子偏好性，评估 GC 含量及潜在二级结构风险

3.               方案设计：生成 3 套优化方案（含不同调控元件组合），附表达效率预测报告

4.               交付与修订：根据客户反馈调整设计，最终提供可直接用于载体构建的优化序列

1.               适用场景

1.               重组蛋白表达预实验设计（提高大肠杆菌表达成功率）

2.               工业酶制剂基因工程改造（增强可溶性表达）

3.               诊断试剂抗原基因优化（降低包涵体形成概率）

1.               客户需提供材料

1.               目的蛋白氨基酸序列（注明物种来源，如人源 / 细菌源）

2.               目标表达菌株信息（如 E. coli Rosetta (DE3)）

3.               特殊功能需求（如耐高温蛋白编码区保护、酶活性中心序列保留）

三、注意事项

1.               实验前

1.               需明确告知蛋白毒性信息（如膜蛋白 / 分泌蛋白），毒性序列可能影响优化策略

2.               提供原始序列时，请标注功能关键区域（如酶活性位点、抗原表位），避免优化过程中误修饰

1.               设计中

1.               若宿主菌株未明确，默认按大肠杆菌 BL21 (DE3) 进行密码子优化

2.               多标签融合设计（如 His+GST 双标签）需提前说明标签连接顺序及酶切位点需求

1.               交付后

1.               合成基因建议搭配对应载体使用（如 pET-28a 用于 His 标签表达），载体酶切位点可在设计阶段预留

2.               提供 1 次免费方案修订服务（限优化策略调整，不包含序列重新设计）

3.               基因序列及设计数据严格保密，默认存储 6 个月后删除（可申请延长保密期限）