压缩PCR增强因子商品图.png

PCR增强因子是一类能够提高聚合酶链反应（PCR）效率和特异性的物质。以下是关于它的简介：

### 常见类型及作用机制 - **二甲基亚砜（DMSO）**：能降低DNA的解链温度，使PCR反应在较低温度下进行，减少非特异性扩增。同时，它可以改变DNA的二级结构，有助于引物与模板的结合，提高PCR的效率。一般使用浓度在5% - 10%（体积分数）。 - **甘油**：可以增加溶液的黏度，降低DNA分子的扩散速度，使引物与模板的结合更加特异，减少错配。此外，甘油还能稳定DNA聚合酶的活性，在一定程度上提高PCR的产量。通常使用浓度为5% - 20%（体积分数）。 - **牛血清白蛋白（BSA）**：主要作用是结合PCR反应体系中的抑制物，如酚、氯仿、重金属离子等，减少它们对DNA聚合酶的抑制作用，从而提高PCR的成功率。一般添加量为0.1 - 0.5 mg/mL。 - **甜菜碱**：能调节DNA的熔解温度，使富含GC的模板更容易解链，同时提高引物与模板的结合特异性，对于扩增GC含量高的DNA片段效果显著。常用浓度为0.5 - 1.5 mol/L。 ### 应用场景 - **复杂模板扩增**：当模板DNA存在复杂的二级结构，如富含GC区域或形成发夹结构等，导致PCR扩增困难时，添加PCR增强因子可以帮助克服这些问题，提高扩增效率。例如，在扩增某些病毒基因组中GC含量较高的区域时，甜菜碱等增强因子能显著改善扩增效果。 - **抑制物存在时**：如果模板DNA提取过程中残留有抑制物，或者样本中本身含有抑制PCR反应的物质，如血液、土壤等样本中的某些成分，加入BSA等增强因子可以结合抑制物，保证PCR反应的顺利进行。 - **提高特异性**：在一些对特异性要求较高的PCR反应中，如基因分型、SNP检测等，使用甘油、DMSO等增强因子可以降低非特异性扩增，提高目的片段的扩增特异性，使结果更加准确可靠。 ### 使用注意事项 - **浓度优化**：不同的PCR增强因子在不同的反应体系和模板条件下，最佳使用浓度有所不同。需要通过预实验进行优化，以找到最适合的添加量。例如，DMSO浓度过高可能会抑制DNA聚合酶的活性，过低则达不到增强效果。 - **兼容性**：某些增强因子可能与特定的DNA聚合酶、缓冲液成分或引物等存在兼容性问题。在使用时要注意选择合适的反应体系，避免因成分之间的相互作用而影响PCR结果。

- **对产物的影响**：一些增强因子可能会对PCR产物的后续应用产生影响，如连接、克隆等。在进行相关实验前，需要考虑增强因子是否会干扰这些操作，并采取相应的处理措施，如纯化PCR产物等。


特别提醒：

1. 试剂使用干冰填充运输，收到货后及时放入-80℃储存。

2. 避免反复冻融，否则会对试剂活性造成一定影响。