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T7 RNA聚合酶是一种在分子生物学领域有着重要作用的酶，以下是关于它的简介：

### 来源与结构 - **来源**：T7 RNA聚合酶来自T7噬菌体，这是一种专门感染大肠杆菌的病毒。T7噬菌体具有一套独特的转录系统，T7 RNA聚合酶是其中关键的酶，负责噬菌体基因的转录。 - **结构**：它是由一条单链多肽组成的相对较小的酶，分子量约为99kDa。其结构包括一个催化核心区域和一些调控结构域。催化核心区域负责RNA的合成，而调控结构域则参与与DNA模板以及其他调控因子的相互作用。 ### 作用机制 - **特异性结合**：T7 RNA聚合酶能够特异性地识别T7噬菌体启动子序列。T7启动子具有特定的核苷酸序列模式，T7 RNA聚合酶通过其结构中的特定结构域与启动子序列进行精确的相互作用，从而准确地定位到启动子区域，启动转录过程。 - **转录起始**：一旦结合到启动子上，T7 RNA聚合酶会使DNA双链解开，形成一个转录泡。然后，它以核糖核苷三磷酸（NTPs）为底物，按照碱基互补配对原则，从转录起始位点开始合成RNA链。 - **转录延伸**：T7 RNA聚合酶沿着DNA模板链移动，持续地将NTPs添加到正在生长的RNA链上，使RNA链不断延伸。在延伸过程中，它能够保持较高的转录效率和准确性，很少发生错配或停顿。 - **转录终止**：当T7 RNA聚合酶遇到特定的转录终止信号时，它会停止RNA的合成，并从DNA模板上释放出来，同时释放出合成的RNA链。 ### 特点与优势 - **高特异性**：只识别T7噬菌体启动子，对其他类型的启动子几乎没有活性，因此可以在含有多种不同启动子的复杂体系中特异性地启动T7启动子下游基因的转录，减少非特异性转录的干扰。 - **高效性**：具有很高的转录效率，能够在短时间内合成大量的RNA。它的转录速度比大肠杆菌自身的RNA聚合酶快很多，这使得它在基因表达研究和体外RNA合成等方面具有很大的优势。 - **忠实性**：在转录过程中具有较高的准确性，能够准确地按照DNA模板的序列合成RNA，减少转录错误的发生，保证了合成的RNA的质量和功能。 ### 应用领域 - **基因表达研究**：在基因工程中，常被用于构建表达载体，使目的基因在特定的宿主细胞（如大肠杆菌）中高效表达。通过将目的基因置于T7启动子下游，利用T7 RNA聚合酶的特异性和高效性，可以实现目的基因的高水平转录和翻译，从而获得大量的目的蛋白，用于蛋白质结构与功能研究、药物研发等。 - **体外转录**：可用于体外合成RNA，如合成mRNA、siRNA、RNA探针等。在体外转录反应中，只需提供含有T7启动子的DNA模板、NTPs、T7 RNA聚合酶以及合适的缓冲液等条件，就可以合成大量的特定RNA序列，为RNA相关的研究和应用提供了重要的工具。

- **噬菌体展示技术**：在噬菌体展示系统中，T7 RNA聚合酶被用于驱动噬菌体外壳蛋白基因与外源多肽或蛋白基因的融合表达，从而使外源蛋白展示在噬菌体表面，用于筛选具有特定功能的蛋白质或多肽。



特别提醒：

1. 试剂使用干冰填充运输，收到货后及时放入-80℃储存。

2. 避免反复冻融，否则会对试剂活性造成一定影响。